Enzymatická imunotest je diagnostická metoda, která se používá k detekci hlíst u dětí a dospělých. Tato studie se vyznačuje nejpřesnějším určením nejen přítomnosti, ale také typu, počtu parazitů a stadia vývoje nemocí, které způsobují..
Enzymatická imunoanalýza - diagnostická metoda, která se používá k detekci helmintů u dětí a dospělých.
Indikace pro vedení
Lékaři předepisují ELISA k invazi v následujících případech:
- počet leukocytů u pacienta významně překračuje normu v případě nepřítomnosti příznaků jiných patologií;
- starat se o časté závratě nebo bolesti hlavy bez zjevného důvodu;
- objevují se alergické reakce;
- ohromen bolestmi svalů, ztrátou síly;
- kašel se nehojí dlouho;
- občas se objeví febrilní stav;
- přítomnost červů je u domácích zvířat detekována;
- epidemiologická situace se v oblasti bydliště zhoršuje;
- profese pacienta je spojena s vysokým rizikem infekce červy (provádí se rutinní diagnostika).
S aktivací parazitů v těle se zvyšuje množství antigenů - toxických produktů, které produkují v důsledku své životní činnosti. Výsledkem je, že pro ELISA se také stanou následující příznaky:
- zažívací poruchy se změnami stolice a její četností;
- bolení břicha;
- kolika v játrech;
- nevolnost měnící se na zvracení;
- příznaky poškození centrální nervové soustavy: nespavost, zvýšená nervozita, náhlé výkyvy nálady.
Typy ELISA
Tělo reaguje na invazi parazitů a jejich antigenů ochrannou reakcí a produkuje protilátky (nebo imunoglobuliny) v krevní plazmě. ELISA odhaluje přítomnost těchto specifických proteinových sloučenin. Od okamžiku infekce hlístami se množství imunoglobulinů tříd G, M a A hromadí v různých časech. Jejich komplex je stanoven během krevního testu.
Metodika studia těchto proteinů je založena na imunitní odpovědi a enzymatické reakci. Imunitní odpověď může být použita k prokázání přítomnosti parazitů a stanovení jejich rozmanitosti.
Imunitní odpověď může být použita k prokázání přítomnosti parazitů a ke stanovení jejich rozmanitosti.
Enzymatická reakce vám umožní studovat typy helmintů identifikovaných laboratorními pomocníky s vizuálním měřením údajů o nich.
V laboratořích se praktikují různé typy ELISA:
- Rovný.
- Nepřímý.
- Sendvičový typ.
- Heterogenní pevná fáze.
Tyto varianty se liší v různých technologických metodách detekce komplexů antigen-protilátka. Nejčastěji používaný heterogenní test na pevné fázi (ELISA). S jeho pomocí je stanovena přítomnost protilátek tříd IgG, IgA, IgM na antigeny patogenů způsobených parazity.
Jak brát
Test ELISA na parazity lze provést studiem vzorků mozkomíšního nebo plodového mléka, hlenu z močové trubice a sklivce. Nejčastěji se však krev odebírá pacientovi z žíly ráno na lačný žaludek. V laboratoři se vzorek nechá projít odstředivkou a oddělí se sérum..
3 dny před darováním krve byste měli přestat užívat všechny léky, kromě těch životně důležitých.
Aby výsledky studie byly co nejspolehlivější, měly by být přísně dodržovány všechny laboratorní požadavky. Je to nutné:
- 3 dny před darováním krve přestaňte užívat všechny léky, kromě těch životně důležitých;
- pozastavit fyzioterapeutické procedury 2 dny předem;
- vzdejte se alkoholu a kávy za 1 den;
- v předvečer nebyli vystaveni fyzickému a emočnímu stresu;
- večeři nejpozději do 19-20 hodin (ráno můžete vypít trochu vody).
Dekódování
Možnost číslo 1. IgM-, IgA +, IgG-: primární onemocnění (2 týdny po infekci).
Varianta číslo 2. IgM +, IgA +, IgG-: primární onemocnění (2,5-3 týdny od doby infekce).
Možnost číslo 3. IgM +, IgA +, IgG +: primární infekce (3-4 týdny po infekci).
Varianta číslo 4. IgM-, IgA +, IgG +: exacerbace chronického onemocnění (2 týdny od začátku exacerbace).
Možnost číslo 5. IgM-, IgA +/-, IgG +: chronická fáze.
Možnost číslo 6. IgM-, IgA-, IgG +: vyléčená (minulá) infekce, přítomnost imunity.
Možnost číslo 7. IgM-, IgA, IgG nejsou detekovány (nebo snižují titr 2-4krát na konci léčby, 5-8krát po 1-1,5 měsíce po léčbě): zotavení.
Možnost číslo 8. IgM-, IgA-, IgG-: nedostatečná imunita vůči infekci.
Dekódování analýzy protilátek tříd IgG, IgA, IgM ukazuje přítomnost nebo nepřítomnost parazitů.
Výhody a nevýhody
Enzymaticky vázaný imunosorbentový test nelze srovnávat se studiem stolice, která byla donedávna jediným způsobem k detekci helmintů. Tato analýza je však nespolehlivá, protože paraziti často vajíčka nekladou dlouho. Pro potvrzení diagnózy je často nutné darovat výkaly. Spolehlivost výsledku analýzy do značné míry závisí na zkušenostech laboratorního asistenta, který se musí naučit vidět mikroskopická vajíčka hlíst.
Metody zkoumání přítomnosti parazitů pomocí ELISA mají řadu výhod:
- analýza prováděná podle stanovených pravidel identifikuje parazity všech typů, které žijí v těle;
- výsledky testů jsou vysoce spolehlivé;
- kvalitativní a kvantitativní ukazatele umožňují stanovit etiologii a stádium choroby;
- lékař má možnost diagnostikovat infekci parazity v rané fázi a sledovat dynamiku vývoje nemoci;
- test netrvá příliš dlouho kvůli automatizaci všech fází analýzy;
- protože metoda ELISA je sjednocená, je s její pomocí umožněno provádět hromadné průzkumy populace.
Pomocí krevního testu ELISA je lékař schopen diagnostikovat napadení parazity v rané fázi a sledovat dynamiku vývoje nemoci..
Je velmi vzácné, že test vede k falešně pozitivním nebo falešně negativním výsledkům. Tento nedostatek může být způsoben technickými chybami. Tyto výsledky jsou možné s revmatoidním faktorem, metabolickými poruchami a jinými chronickými onemocněními, díky kterým jsou vytvářeny ochranné protilátky, a také při užívání některých léků, jako je inzulín.
Navíc tento test není k dispozici pro všechny kliniky. Ve venkovských zdravotnických zařízeních dochází často k přerušení dodávek chemických činidel pro ELISA. Kromě toho se enzymový imunotest provádí všude jen za poplatek..
Jaké parazity lze identifikovat
Metoda ELISA stanoví:
- tasemnice (vepřové tasemnice);
- škrkavky (škrkavky, škrkavky, toxokary, silná aloiditida);
- flatworms (cestodes, flukes, nematodes);
- trichinella;
- obří a játrové motolice;
- opisthorchis;
- lamblia;
- améba;
- toxoplazma;
- Leishmania.
Analýza ELISA - co to je, přepis enzymatického imunotestu na parazity, syfilis, HIV, tuberkulóza. Norma v tabulce, výsledky
Díky vývoji moderní medicíny se lékař při stanovení diagnózy již nemusí soustředit na nepřímé projevy nemocí ani provádět vícestupňové laboratorní testy. Stačí provést jednu analýzu, která potvrdí nebo popře údajnou počáteční diagnózu.
Tato metoda je enzymatická imunosorbentová zkouška (ELISA) - tato studie vám umožní detekovat specifické protilátky a antigeny vlastní různým patologiím, což výrazně urychluje diagnostiku.
Co je ELISA
Analýza ELISA je laboratorní studie (metoda), která pomáhá určit přítomnost nebo nepřítomnost určitých protilátek v těle, které bojují s virem a jejich množstvím.
Základem studie je přirozený reakční antigen (objekt škodlivý pro organismus) - protilátka (protein, který ničí škodlivé objekty), což umožňuje detekovat přítomnost různých virů, bakterií.
ELISA je přirozená imunitní odpověď těla - interakce protilátky s odpovídajícím antigenem. Během ELISA se tedy do zkumavky s materiálem přidávají antigeny nebo protilátky střídavě, poté se detekuje koncentrace výsledných komplexů antigen-protilátka..
Pokud se vytvoří shody, vzniknou imunitní komplexy, pak nastane enzymatická reakce barviva s kombinovanou molekulou. Je to kvůli změně barvy během enzymatické indikace, že onemocnění je identifikováno po studiu hladiny stanovené sloučeniny.
Typy imunoglobulinů
Lidské imunoglobuliny se dělí do několika tříd, které se od sebe liší svými vlastnostmi, strukturou a antigenními vlastnostmi těžkých řetězců (H-řetězce). U všech savců, včetně lidí, je izolováno pět H-řetězců, které určují příslušnost imunoglobulinů do odpovídající třídy: G, M, A, D, E.
Každá třída se od sebe liší biologickými vlastnostmi a schopností vázat antigeny a rychlostí a silou vazby s molekulou.
Funkce každého imunoglobulinu (lg) jsou různé:
Množství v těle | Funkce | Poločas (dny) | Hodnota | |
G | 70% | Vytváří pasivní imunitu u novorozence; zásadní pro imunitní odpověď zlepšit fagocytózu, | 21-24 | poskytují dlouhodobou humorální imunitu u infekčních chorob |
M | 5-10% | k aktivaci fagocytózy, schopen vázat 5 molekul antigenu, | Pět | Poskytuje primární imunitní odpověď |
A | 10-15 | Neutralizuje toxiny a viry nutné pro vytvoření časné imunity Tvorba lokální imunity | 4-5 | Ochrana sliznic |
E | 0,2% | způsobit alergie a anafylaxi; aktivovat tkáňové bazofily | 2 | Ochrana proti parazitům |
D | 0,2% | zapojený do produkce lymfocytů, je nezbytný jako membránový receptor pro antigeny; | 3 | Jejich role je špatně pochopena |
Imunoglobuliny se objevují podél jakési „řetězce“ - lgM lgG, takže tělo reaguje na výskyt antigenu v těle. Při laboratorní diagnostice se hodnotí koncentrace tří hlavních imunoglobulinů - G, M, A.
Indikace pro provedení analýzy imunoglobulinů
Analýza ELISA se každým rokem stává stále populárnější.
Taková studie urychluje diagnostiku, a to je velmi důležité pro léčbu patologických stavů, jako jsou:
- virová hepatitida;
- Infekce HIV;
- cytomegalovirus,
- Virus Epstein-Barr,
- herpes virus,
- spalničky
- zarděnky,
- tuberkulóza,
- salmonelóza,
- úplavice,
- klíšťová encefalitida,
- Bakterie Helicobacter,
- borelióza,
- tetanus,
- syfilis,
- záškrt,
- leptospiróza,
- chlamydie,
- ureaplasmóza,
- mykoplazmóza,
- Černý kašel.
Analýza také umožňuje určit infekci parazity:
- flatworms
- Ascaris
- histolické améby,
- jaterní tremady,
- lamblia,
- toxoplazma,
- trichinella,
- fluke,
- cestodóza.
ELISA je druh markeru autoimunitních patologií a maligních novotvarů.
Příprava na zkoušku
Při přípravě na studium byste měli dodržovat následující pravidla:
- den před odběrem krve nesmíte kouřit ani pít alkohol,
- nehrají sport ani jinou fyzickou aktivitu,
- pokuste se vyhnout stresu,
Před provedením analýzy ELISA se musíte vyhnout stresu.
Lékaři také doporučují dodržovat zvláštní dietu - vyloučit mastná a smažená jídla, a pokud je studie prováděna na hepatitidu, pak je nutné nejíst žádnou pomerančovou zeleninu a zejména citrusové plody. Darujte krev ráno na lačný žaludek.
Klamná pozitivní analýza je způsobena nesplněním doporučení, zejména konzumací mastných potravin, což vede k příliš vysoké koncentraci triglyceridů v plazmě, díky čemuž klesá vodivost ELISA.
Postup odběru vzorků
Jako zkušební materiál lze použít plnou krev, sérum nebo žilní krevní plazmu. Materiál se sbírá, obvykle z kubické žíly, proto se používá jednorázová jehla a vakuová trubice, je potřeba 5-10 ml krve.
Pro přesnost výsledku je důležité dodržovat správnou techniku odběru vzorků - propíchnutí samotné cévy a okolních tkání musí být provedeno jednou manipulací, proto se použije krátká jehla s velkým průměrem, aby nedošlo k poškození protilehlé stěny žíly a aby nedošlo k poškození červených krvinek.
Pro zachování integrity červených krvinek je také nezbytné, aby krev stékala stěnami zkumavky.
Během skladování materiálu by nemělo dojít k jeho možné ionizaci, navíc by se materiál neměl dostat do kontaktu se zbytky dezinfekčních prostředků, proto se používá pouze jednorázová plastová trubička, označená jménem pacienta, datem a časem dodání materiálu.
Pokud je požadováno krátkodobé skladování zkoušeného materiálu, použije se chladicí komora s teplotou 2–4 ° C, je-li vyžadováno delší skladování, je materiál zmrazen při teplotě -20 ° C..
Jak se provádí analýza
Po přípravě zkoušeného materiálu přistoupí laboratorní lékař k nezbytným manipulacím. K tomu se používá řada speciálních antigenů, které mají vlastnost vyvolat reakci těla na dráždivé látky, jedná se o různé infekce, hormony, alergeny.
Schéma očekávané reakce "antigen-protilátka" vypadá takto:
- Primární reakce - detekovatelný Ig (Ab) a čištěný patogenní antigen (Ag).
- K detekci výsledných imunitních komplexů následuje nová imunologická reakce, kde přidružený specifický Ig působí jako antigen a Ig konjugát (Ab) pro něj působí jako protilátka.
- Posledním stupněm je enzymatická reakce společně s katalyzátorem konjugované molekuly. Substrátem je chromogen (nebarvený), který je zbarven během reakce, a je stanovena intenzita barvy a kvantitativní indikátor imunoglobulinu ve vzorku..
V současné době byla vyvinuta široká škála variant ELISA, neexistuje jasná klasifikace. Obvykle se metody zvažují na základě rozdělení na heterogenní a homogenní - všechny fáze analýzy se vyskytují pomocí pevné fáze nebo pouze pomocí roztoku.
Moderní klinické diagnostické laboratoře obvykle používají heterogenní (pevnou fázi) ELISA, ve které pevná fáze znamená absorpci antigenů nebo protilátek na pevném povrchu speciálních jamek umístěných na polystyrenové mikrodestičce, metoda je rozdělena na přímou a nepřímou ELISA.
Při přímé ELISA se zavedený antigen fixuje během inkubačního procesu na povrchu prázdných jamek, proto se testované vzorky umístí do čistých jamek po dobu 20-25 minut, což je nezbytné, aby se antigen připojil k jejich povrchu. Poté se přidá požadovaná protilátka. Dále materiál zůstává po určitou dobu, aby vytvořil pouta..
Protilátky jsou vždy přidávány v nadbytku, a proto, i když jsou přítomny, nevázané antigeny zůstávají ve vzorku, a pokud vůbec neexistují žádné antigeny, nebudou existovat žádné vazby. Pro odstranění „extra“ protilátek se provede dekantace, po které zůstanou pouze ty protilátky, které vytvořily vazbu s antigenem.
Následuje enzymatická reakce - do jamek se přidá roztok s enzymem a výsledné vazby se zabarví.
Při nepřímé metodě ELISA se používají protilátky, které se dříve kombinovaly se substrátem enzymatické reakce; v tomto případě dochází k navázání protilátek na antigen během inkubačního procesu, po kterém se mobilizují vazby na povrchu jamek a poté se zavede konjugát a substrát-chromogenní činidlo, které zbarví reakci.
Hlavní rozdíl mezi nepřímou a přímou metodou tedy není adheze materiálu k povrchu čistých jamek, ale vazba k antigenu imobilizovanému na destičce..
Průběh reakce se zastaví s použitím specializovaných zařízení, poté se každá jamka podrobí fotometrickému procesu, po kterém následuje srovnávací charakteristika výsledku získaného u dříve provedených kontrolních vzorků..
Pokud je ve vzorku detekováno zvýšení optické hustoty, je také nadhodnocena koncentrace specifických protilátek ve výsledku testu..
Když je analýza připravena
Studie netrvá příliš dlouho, od odběru krve po získání výsledku, trvá 1 až 10 dní, v závislosti na diagnostických opatřeních.
Výsledky zkoušek a jejich interpretace
Diagnostická forma přijatá pacientem ukazuje negativní nebo pozitivní výsledek pro určité třídy imunoglobulinů, jakož i kvantitativní ukazatel různých tříd protilátek.
Jsou možné různé interpretace výsledků:
- IgM (+) (IgA, IgG nebyly detekovány) - proces zotavení;
- IgM (-); IgG (+), IgA (+) - chronická infekční patologie;
- IgM, IgG, IgA (všechny s hodnotou) - nedostatek obranných mechanismů proti infekcím;
- IgG (+/-) a IgA (+/-), IgM (+) - akutní proces;
- IgM (-), IgA (-), IgG (+) - postinfekční imunita;
- IgM, IgG, IgA (+) - chronická patologie v akutním stadiu.
Například, pokud byly detekovány IgG a IgM, pak může mít pacient jedno z následujících onemocnění:
- virová hepatitida;
- cytomegalovirus;
- opar;
- Plané neštovice;
- chlamydie;
- stafylokoková nebo streptokoková infekce.
Pro hormonální studie se často předepisuje enzymatický imunotest, normy jsou uvedeny v tabulce:
Hormonální jméno | Podlaha | Norma | |
1 | thyroglobulin | m / f | Až 70 IU / ml |
2 | tyroxin | m / f | 64-146 nmol / l |
3 | trijodtyronin | m / f | 1,8 - 2,8 nmol / l |
4 | Zdarma tyroxin | m / f | 11-25 pmol / l |
Pět | Zdarma triiodritonin | m / f | 4,49 - 9,3 pmol / l |
6 | Testosteron, dehydrotestosteron | F | 0,5 - 10 mU / l |
Analýza ELISA je diagnostická studie, která vám umožní posoudit pravděpodobnost vzniku onkologických patologií. Interpretaci výsledků však provádí pouze ošetřující lékař..
Význam výsledků testu
ELISA je vhodná pro detekci různých forem genitálních infekcí, včetně syfilis, a často se používá pro screening těhotných žen.
Díky této studii můžete zjistit, jak dlouho k infekci došlo a stádium nemoci v době studie:
- imunoglobuliny M ukazují dobu trvání onemocnění;
- IgA - pacient byl infikován před více než 30 dny;
- IgG je detekován na „vrcholu“ nemoci nebo v okamžiku, kdy terapie nedávno skončila.
V průběhu výzkumu zůstávají jamky na destičce se záporným indikátorem bezbarvé a pozitivní se změní na jasně žlutou. Pokud se barva pozitivních jamek neshoduje s barvou kontroly, je výsledek považován za pochybný a je nutné provést nové vyšetření..
Enzymový imunotest je prvním krokem v diagnostice HIV. Analýzu nelze provést bezprostředně po údajné infekci, je nutné počkat do konce inkubační doby (od 14 dnů do 6 měsíců).
Během analýzy jsou stanoveny protilátky proti HIV-1 a HIV-2, hledání protilátek třídy G, které se obvykle objevují později, a protilátek třídy A a M, které mohou být detekovány v raných stádiích (během inkubační doby).
Po obdržení pozitivních vzorků:
- pokud je první test pozitivní, je krev znovu zkontrolována jiným laboratorním asistentem;
- opakovaný pozitivní výsledek znamená opakování materiálu,
- při opakovaném výsledku je pacientovi přiřazeno imunoblotování.
Konečný závěr o výskytu infekce HIV je vydán až po výsledku imunoblottingu.
ELISA se také používá jako diagnostická studie tuberkulózy, ale i když byly u pacienta detekovány protilátky na tuto patologii, ne vždy to potvrzuje přítomnost tuberkulózy, proto se ELISA často používá jako objasňující technika nebo pro diagnostiku latentní extrapulmonární formy..
ELISA analýza je taková studie, která vám umožní detekovat infekci parazity a prvoky u pacienta, během diagnostiky můžete dokonce určit dobu infekce.
Chlamydia | Cytomegalovirus | Paraziti |
IgM - detekovatelné 7 dní po infekci, | IgM jsou detekovány 30-45 dní po infekci nebo během reaktivace infekce během 4-6 měsíců | Během studie se stanoví IgME. IgG - chronická fáze invaze |
IgA - infekce se vyskytla před více než 30 dny | ||
IgG - invaze je v akutní fázi | ||
IgG - potvrzuje diagnózu a ukazuje účinnost léčby |
Výhody a nevýhody analýzy
ELISA má mnoho výhod, což vysvětluje její popularitu mezi lékaři a pacienty, jsou to:
- vysoká přesnost výsledku,
- dostupná cena,
- rychlý výsledek,
- identifikace stádia choroby,
- kontrola nemoci v čase.
Nevýhodou je však také výhoda - ve vzácných případech je analýza falešně pozitivní nebo falešně negativní..
Proč může být výsledek nespolehlivý
V důsledku toho mohou vzniknout chyby v důsledku technických porušení, protože analýza je nespolehlivá u lidí s některými chronickými onemocněními (revmatoidní faktor), která se vyznačují tvorbou specifických protilátek.
Konečný výsledek je také ovlivněn užíváním léků pacienty a metabolickými poruchami. Z těchto důvodů vyžaduje pozitivní výsledek pro HIV a onkopatologii opakovaný odběr vzorků.
Náklady na výzkum
Cena ELISA se liší v závislosti na směru diagnostiky (rublů):
- hepatitida 250 - 900;
- viry - 250-1000;
- HIV - 250-350;
- helmintické invaze - 280 - 900;
- syfilis -150-250;
- plísňové infekce 400-500.
Enzymaticky vázaný imunosorbentový test je jednou z nejúčinnějších metod pro zkoumání různých virových patologií, parazitárních infekcí a onkologických patologií. Studie, jako je ELISA, velmi usnadňuje diagnostiku, tato analýza by však neměla být interpretována pacientem samostatně, do dekódování by měl být zapojen pouze lékař..
Autor článku: Bacio
Design článku: Oleg Lozinsky
Co je to enzymový imunotest?
S pokrokem moderní medicíny je možné provádět podrobnější diagnostiku v případě podezření na určité patologie u pacienta. Jednou z informativních metod laboratorního výzkumu je analýza ELISA, která se provádí metodou odběru vzorků žilní krve. To znamená, že pro pacienta se nic obecně nezmění. Laboratorní analyzátor ELISA však provádí složitou techniku pro studium shromážděného biomateriálu. Co jsou analýzy ELISA a jaké jsou jemnosti použití metody ELISA jako diagnostické, rozumíme níže uvedenému materiálu.
Co je to enzymový imunotest?
Enzymaticky vázaný imunosorbentový test je jednou z metod laboratorní diagnostiky, která je založena pouze na reakci zvané „antigen-protilátka“. Zde je užitečné pochopit, že antigen je cizí proteinová sloučenina (molekula), která vstoupila do lidského těla parazitární, virovou nebo jinou infekcí. To znamená, že je to prostě škůdce. Protilátka je zase imunitní buňka (imunoglobulin), která chrání lidské tělo, když se v něm nacházejí cizí molekuly.
Produkce protilátek je vyvolána samotnými antigeny, které pronikly do lidského těla. Při vstupu do „bitvy“ o zdraví těla se zdá, že protilátky značí antigeny, což vidí laboratorní asistent při vyšetřování krve. To znamená, že ve shromážděném biomateriálu je možné sledovat nejen přítomnost infekce, ale také její stopy po úplném zotavení těla.
Při provádění testu ELISA může laboratorní asistent vidět na antigeny následující imunoglobuliny:
- Imunoglobuliny M (uvedené ve výsledcích jako IgM). Naznačují, že infekční proces v těle nabývá na síle. To znamená, že k infekci došlo zcela nedávno;
- Imunoglobuliny G (uvedené jako IgG). Přispějte k destrukci antigenů několik dní po zavedení infekce do lidského těla. Imunoglobuliny G mohou být v těle pacienta po dlouhou dobu a vytvářejí imunitu vůči určitému viru;
- Imunoglobuliny E (uvedené jako IgE). Naznačte parazitární infekce v těle. Hovoří také o atopických reakcích u alergií. Je třeba vědět, že test ELISA dává výsledek s přesností 90% pro parazitární infekce;
- Imunoglobuliny A (uvedené jako IgA). Chraňte pacientovy sliznice co nejvíce.
Předepsáním imunosorbentového testu s enzymem spojeného s pacientem tedy ošetřující lékař může sledovat trvání infekce, stupeň její progrese nebo odhalit přítomnost imunity vůči jedné nebo druhé infekci..
Diagnostický proces ELISA vypadá takto:
- Odebraná žilní krev je přivedena do stavu krevního séra v laboratoři;
- Pak laboratorní asistent použije speciální podnos s buňkami, z nichž každá již obsahuje všechny potřebné antigeny. Stačí jen kapka krve do každé buňky a sledovat reakci imunoglobulinů (protilátek) na antigeny. Přítomnost „požadované“ reakce je doložena změnou barvy zkoušeného materiálu. Následně laboratorní asistent studuje optickou hustotu zkoumaného média.
Enzymatický imunotest parazitů obecně pomáhá identifikovat takové parazitární patologie:
- Ascariasis a enterobiasis (škrkavky a pinworms);
- Trichinóza;
- Opisthorchiasis v akutních a chronických formách;
- Giardiasis;
- Amebióza;
- Toxoplazmóza;
- Leishmanióza v jakékoli formě.
Důležité: enzymatický imunotest je jak kvalitativní, tak kvantitativní. V prvním případě laboratorní asistent pouze potvrdí nebo vyvrátí přítomnost požadované látky v krvi. Ve druhém případě je na základě analýzy indikována jeho koncentrace v těle pacienta.
Nevýhody metody
Se všemi výhodami této diagnostické metody je užitečné pochopit, že imunosorbentový test s enzymem není způsob, jak najít příčinu nemoci pacienta, ale pouze způsob potvrzení diagnózy navržený ošetřujícím lékařem. A protože výzkum není dostatečně levný, musíte jej používat rozumně. Výsledky studie by navíc měly být interpretovány pouze kvalifikovaným odborníkem..
Příprava na testování parazitů
Je důležité pochopit, že identifikace parazitů pomocí krevního testu vyžaduje určitou přípravu od pacienta. Před darováním krve tedy musíte udělat následující:
- Den před odběrem vzorků z biomateriálů, mastných potravin, alkoholu a uzeného masa musí být ze stravy vyloučeny;
- Krev pro enzymatický imunotest na parazity a jiné infekce by měla být odebrána ráno na lačný žaludek;
- Před darováním krve je zakázáno kouřit po dobu nejméně 3–4 hodin;
- V den odběru krve je vhodné, abyste nebyli nervózní a nevyužívali zvýšenou fyzickou aktivitu.
Dodržování těchto pravidel zabrání falešně pozitivním výsledkům u protilátek proti parazitům..
Dekódování výsledků
Poté, co jsme vyřešili zkratku ELISA a co se zjistilo, stojí za to přejít k interpretaci výsledků. Je důležité pochopit, že pokud byla analýza kvalitativní, bude výsledek pouze pozitivní nebo negativní. To znamená, že diagnóza buď potvrdí podezření lékaře ohledně určité diagnózy, nebo je vyvrátí. V tomto případě bude formulář obsahovat symboly „+“ nebo „-“.
Důležité: negativní výsledek testu neznamená vždy nepřítomnost infekce. Faktem je, že protilátky proti antigenům se mohou tvořit do 14 dnů po infekci a je pravděpodobné, že se dosud nevytvořily.
Pokud se provádí kvantitativní analýza, stanoví se zde typ protilátek, jejich množství a stupeň aktivity. Zejména s takovou diagnózou se stanoví protilátky (imunoglobuliny) IgG a IgM, které se vytvářejí v různých obdobích progrese infekce. Nejběžnější výsledky v tomto případě jsou:
- Zvýšená hladina IgM a úplná absence IgG. Tento obrázek ukazuje nedávnou infekci a akutní fázi patologie..
- Zvýšená aktivita obou typů imunoglobulinů (IgM a IgG). Hovoří o dlouhodobém a chronickém průběhu infekčního procesu.
- Aktivita IgG a úplná absence IgM. Infekce byla nejméně před šesti měsíci a nyní je virus v prodlouženém chronickém stadiu.
- Nedostatek protilátek IgG a IgA. Výsledek není definován.
- Absence protilátek IgM, IgA a IgG. Označuje nedostatečnou imunitu vůči konkrétní infekci.
- Aktivita protilátek IgG, IgM a IgA naznačuje exacerbaci chronického procesu.
Kromě identifikace typů protilátek, laboratorní asistent ve zvláštním sloupci formuláře uvádí jejich počet na objemu krve. Nezapomeňte, že po pochopení toho, co je metoda ELISA, výsledky neinterpretujte sami. Získané výsledky mohou být interpretovány s přesností pouze ošetřujícím lékařem, v závislosti na údajné diagnóze, sestavené na základě klinického obrazu pacienta.
Imunoassay krevní test s dekódováním indikátorů
Diagnostické metody naší doby umožňují určit konkrétní nemoc v laboratoři pomocí speciálních testů. Jedním z nich je enzymatický imunosorbentový test, díky kterému je možné potvrdit předběžnou diagnózu..
Co je to enzymový imunotest
ELISA je jednou z nejúčinnějších a nejmodernějších metod pro detekci infekčních chorob, poruch spojených s imunitními a hormonálními poruchami, jakož i onkologických procesů. Během krevního testu mohou být v krvi detekovány protilátky, které vznikají při infekci v těle. Vzhledem k této nuanci lze nemoc odhalit i v nejranějším stadiu jejího vývoje..
Jaký je základ této techniky
Výsledky analýzy ELISA jsou založeny na získání chemických reakcí pro enzymy, které slouží jako zvláštní identifikační značky pro rozpoznávání protilátek. Protilátky tedy během imunochemických reakcí interagují s některými antigeny. To vše dává důvod k tvrzení, že falešné výsledky při darování krve pro ELISA jsou minimální..
Studie umožňuje určit počet imunitních buněk, jejich vlastnosti a přítomnost potřebných protilátek
Pozitivní výsledek se považuje za nalezenou v roztoku. Barevné signály, které antigeny interagují s protilátkou. Pokud se nic takového nestane, výsledek je negativní..
Pozitivní aspekty ELISA
Vzhledem k tomu, že tato technika je založena na metodě získání imunitní odpovědi z lidského těla, je tato metoda nepřímou diagnostickou metodou..
Výhody enzymatického imunotestu krve:
- Dostupnost různých úprav analýzy.
- Vysoká přesnost a zpracovatelnost.
- Pravděpodobnost chybné analýzy je snížena na téměř nulu.
- Používá se k diagnostice nemocí nejen u dospělých, ale také u dětí.
- Všestrannost. Odběr vzorků z analýzy vám umožní potvrdit přítomnost choroby nebo naopak vyvrátit obavy.
Jaká onemocnění lze detekovat pomocí ELISA
Jak bylo uvedeno výše, pomocí analýzy můžete identifikovat řadu poruch charakteristických pro přítomnost jednoho nebo druhého onemocnění. Mnoho odborníků proto předepisuje ELISA pro většinu pacientů..
K dnešnímu dni krevní test pomocí výše uvedené techniky umožňuje detekovat přítomnost mnoha infekcí uvedených v tabulce:
Název nemoci | Popis |
---|---|
Virová hepatitida | Jedná se o běžné a nebezpečné onemocnění jater, které jsou obvykle způsobeny viry.. Dnes existuje pět typů virů, které mohou vést k hepatitidě. Jsou označeny těmito latinskými písmeny: A, B, C, D, E. |
Syfilis | Jedná se o pohlavně přenosné onemocnění, které lze pomocí ELISA snadno detekovat. Je velmi důležité odhalit toto onemocnění co nejrychleji, aby to nepříznivě neovlivnilo vaše celkové zdraví.. |
Cytomegalovirová infekce | Cytomegalovirus je původcem onemocnění. Nemoc může být přenášena z matky na dítě (uvnitř lůna), vzduchovými kapičkami nebo pohlavním stykem s nosičem. Proto je obvykle na všechny budoucí matky předepsán krevní test na ELISA.. |
HIV | Virus imunodeficience je nemoc, která postupuje velmi pomalu, ale přesto je extrémně nebezpečná. Důvod je ten, že virus postupně útočí na buňky imunitního systému, v důsledku čehož se tělo stává zranitelným vůči všem, dokonce i těm nejvýznamnějším mikrobům a bakteriím.. |
Chlamydia | Díky enzymatické imunosorbentové zkoušce je možné nejen potvrdit přítomnost infekce, ale také určit velmi přesně hormony, protilátky, antigeny a mnohem více, což umožňuje vysoce kvalitní a efektivní léčbu. Kromě toho analýza umožňuje co nejpřesněji pochopit, kdy došlo k infekci a jaké negativní důsledky byly v těle způsobeny v přítomnosti chlamydií. |
Opar | Herpes lze přenášet jak vzduchovými kapičkami, tak během nechráněného styku. Toto onemocnění je nebezpečné, protože negativně ovlivňuje práci mnoha tělesných systémů.. Virus může být stanoven kvalitativně i kvantitativně. Pokud se použije první metoda, je možné detekovat přítomnost protilátek, typ viru a také možnost existence předchozích relapsů. Pokud jde o kvantitativní, umožňuje určit typ protilátek nebo jednodušeji stav imunity proti viru. |
Vzhledem k tomu, že detekce nemoci je možná již v rané fázi, lze tuto chorobu léčit okamžitě, a proto je možné na ni dostatečně rychle zapomenout.
Jak se připravit na test
Enzymaticky vázaný imunosorbentní test je odebírán ze žíly a ne z prstu, jak si někteří myslí. Aby byly údaje správné, je třeba dodržovat řadu jednoduchých pravidel.
Vzorek krve pro výzkum je odebrán z kubické žíly
- Pár dní před testem nezvedejte závaží ani neprovádějte těžkou fyzickou práci.
- Nepijte alkohol nebo kouř denně (nemůžete být ani v kouřové místnosti).
- Udržujte maximální klid.
- Testy můžete provádět nejdříve 10 dní po užití léků.
Některé prášky mohou ovlivnit výsledek analýzy, takže pokud není možné zrušit příjem, měli byste o tom informovat lékaře.
Někteří odborníci také doporučují jít na lehkou dietu pár dní před analýzou. Jedná se o zdržení se uzených, smažených a slaných potravin. Pokud je darována krev za účelem zjištění přítomnosti hepatitidy, neměly by se konzumovat ani citrusové plody ve formě ovoce a ve formě šťávy..
Odborníci doporučují jít na lehkou dietu pár dní před analýzou.
V případě, že je nutné zjistit porušení hormonálního pozadí, může obecný rozbor ovlivnit měsíční cyklus žen. V tomto případě sám lékař stanoví datum, kdy bude provedení analýzy nejoptimálnější..
Níže je uvedena tabulka, která ukazuje změny normální hladiny luteinizačního pohlavního hormonu na základě dne menstruačního cyklu..
Údaje o změnách normální hladiny luteinizačního pohlavního hormonu v tabulce
Počet dní | Hladina hormonů |
---|---|
1-12 den | 12-14 mU / l |
12-14 den | 24-150 mU / l |
15 dní před zahájením nového cyklu | 2-17 med / l |
Analýza umožňuje identifikovat různé typy protilátek v těle, které se projevují v každém stadiu vývoje nemoci. Když se nemoc pouze cítila, aktivně se vytvářejí protilátky IgM. Pokud byly nalezeny, znamená to, že došlo k nějaké nemoci..
Po produkci IgM začíná produkce IgG, což naznačuje, že osoba je buďto nositelem infekce, nebo že byl nedávno nemocný něčím infekčním. Obvykle lze detekovat IgG po 3-4 týdnech, počítaje od počátku vývoje IgM, ale některé protilátky mohou být v těle roky.
Existuje také taková třída protilátek, jako je IgA, která ukazuje na přítomnost chronické infekce v těle. Pokud se zjistí, okamžitě se zahájí léčba a poté se znovu provede krevní test ELISA, aby se zajistilo, že léčba přinesla ovoce.
Situace je poněkud odlišná u dětí mladších než jeden a půl roku, v jejichž těle v prvních fázích života, aby byla zajištěna spolehlivá ochrana proti virům, jsou protilátky IgG přítomny ve velkém počtu. Proto při kontrole dětí je hlavní pozornost věnována třídě IgM..
Níže je uvedena tabulka, která ukazuje kombinace přítomnosti nebo nepřítomnosti infekce.
Tabulka přepisů pro ELISA normy krevních testů na přítomnost (nepřítomnost) infekcí
IgM | IgG | IgA | Dekódovací indikátory |
---|---|---|---|
- | - | - | Žádná imunita vůči infekci |
- | + | - | Existuje postvacinal (specifická imunita vůči infekčnímu onemocnění vyplývajícímu z očkování) nebo postinfekční imunita |
+ | -/+ | -/+ | Akutní infekce |
+ | + | + | Exacerbace chronické infekce |
- | +/- | +/- | Mít chronickou infekci |
Vyvodíme-li závěry, můžeme říci, že když se v těle nacházejí protilátky určitého typu, pak se vedle hodnoty v tabulce nachází znak „+“..
Někdy, po obdržení analýzy, může lékař předepsat jinou, aby identifikoval kvantitativní obsah látky v těle..
Rozdělení imunosorbentového testu s enzymem by měl provádět pouze specialista, který porovná získané výsledky s existujícími příznaky a předepíše kompetentní léčbu.
Krevní test ELISA
Enzymaticky vázaný imunosorbentový test (ELISA) se provádí za účelem komplexního posouzení ochranných funkcí těla. V průběhu studie se stanoví počet a vlastnosti imunitních buněk, přítomnost nezbytných protilátek. Krevní test ELISA se provádí k diagnostice infekčních, hematologických, autoimunitních onemocnění, primárních a sekundárních imunodeficiencí. Zvažte, co představuje krevní test ELISA a jaké indikace existují pro tuto studii..
Co to je
Krevní test ELISA je laboratorní test, který detekuje protilátky nebo antigeny ve vzorku krve. Tato studie se používá k detekci hladiny imunoglobulinů, imunologických komplexů, hormonů.
Indikace pro analýzu
Pro jmenování krevního testu ELISA existují následující indikace:
- diagnostika pohlavně přenosných infekcí - ureaplasma, mykoplazma, chlamydie, trichomonas, syfilis;
- diagnostika virových onemocnění - cytomegalovirus, herpes, hepatitida, virus Epstein-Barrové;
- stanovení hladin hormonů;
- diagnostika onkologických chorob;
- definice imunodeficience;
- diagnostika alergií;
- předoperační komplexní vyšetření před transplantací orgánů;
- hodnocení účinnosti terapie.
Princip metody
Princip fungování enzymově vázané imunosorpční metody je založen na stanovení specifických proteinových protilátek v krvi - imunoglobulinů. Imunoglobuliny jsou produkovány lidským imunitním systémem, když do těla vstupují antigeny (cizí mikroorganismy). Tyto imunitní molekuly vážou a neutralizují mnoho infekčních agens v těle..
Imunoglobuliny mají důležitou charakteristiku - specifičnost. Díky tomu se mohou vázat na specifický antigen a vytvářet komplex antigen-protilátka. Během krevního testu ELISA je kvalitativní a kvantitativní stanovení tohoto komplexu.
Existuje pět tříd imunoglobulinů. Obvykle jsou však definovány tři třídy - imunoglobuliny A, M, G. Tyto protilátky se v těle hromadí v různých časech od okamžiku infekce.
- Imunoglobuliny třídy M (IgM) se objevují v krvi úplně první pátý den od okamžiku infekce. Zůstávají v těle po dobu 5-6 týdnů, poté zmizí z krevního řečiště. Protilátky IgM indikují akutní období onemocnění nebo zhoršení nemoci v jejím chronickém průběhu.
- Asi 3–4 týdny po infekci se v krvi objevují imunoglobuliny třídy G (IgG). Mohou existovat v lidské krvi několik měsíců nebo dokonce let. Podle transkriptu krevního testu ELISA, je-li množství imunoglobulinů IgG zvýšeno ve dvou vzorcích krve odebraných postupně o dva týdny později, mluví o současné infekci nebo reinfekci - reinfekce stejnou infekcí.
- Imunoglobuliny třídy A (IgA) mohou být detekovány touto výzkumnou metodou 2–4 týdny po infekci nebo exacerbaci infekčního onemocnění. Z nich pouze 20% cirkuluje v krvi, zbytek je v sekreci sliznic. IgA protilátky zmizí z krevního řečiště do 2 až 8 týdnů po ničení infekčních agens. Zmizení těchto imunoglobulinů znamená léčbu infekce. Pokud je po ukončení onemocnění stanovena přítomnost protilátek IgA v krvi, pak se onemocnění dostalo do chronického stádia.
Příprava na analýzu
Pro analýzu krve metodou ELISA se nejčastěji používá lidská krev. Můžete však také zkoumat obsah sklivce, mozkomíšního moku, plodové vody.
Vzorek krve pro výzkum je odebrán pacientovi z kubické žíly. Doporučuje se darovat krev na lačný žaludek (od posledního jídla by mělo uplynout nejméně 12 hodin). Pokud pacient užívá léky, je nutné informovat lékaře, protože některé z nich mohou změnit výsledek testu. Spolehlivost výsledků výzkumu je ovlivněna příjmem alkoholu a drog.
Dekódování
Forma výsledku této analýzy naznačuje pozitivní (+) nebo negativní (-) výsledek stanovení každé třídy imunoglobulinů.
Zvažte interpretaci možné interpretace krevního testu ELISA.
- Negativní výsledek IgM, IgG, IgA - nedostatek imunity vůči infekci.
- Negativní IgM, IgA a pozitivní IgG - imunita po infekci nebo po vakcinaci.
- Negativní nebo pozitivní IgG, IgA a pozitivní IgM - akutní infekce.
- Pozitivní výsledek IgM, IgG, IgA - exacerbace chronického infekčního onemocnění.
- Negativní IgM a negativní nebo pozitivní IgG, IgA - chronická infekce.
- Negativní výsledek IgM a IgG nedetekovatelné, IgA - zotavení.
Výhody metody
Krevní test ELISA má mnoho výhod. Hlavní lze rozlišovat:
- relativně vysoká přesnost (citlivost);
- možnost včasné diagnostiky;
- schopnost sledovat dynamiku infekčního procesu;
- vysoká úroveň sjednocení, která umožňuje hromadné zkoušky;
- krátkou dobu potřebnou k získání výsledku analýzy;
- snadnost použití;
- automatizace všech fází analýzy;
- relativně nízké náklady.
nevýhody
Nevýhodou testu ELISA je, že někdy dává falešně negativní nebo falešně pozitivní výsledky. Kromě technických chyb v průběhu studie může být příčinou falešných výsledků revmatoidní faktor pacienta, přítomnost chronických onemocnění (při nichž jsou vytvářeny protilátky), metabolické poruchy a užívání některých léků.
Krevní test ELISA na parazity
Pomocí této metody krevního testu se v těle stanoví přítomnost následujících parazitických procesů:
- ascariasis;
- trichinóza - analýza se provádí několikrát, maximální hladina protilátek je stanovena 4 až 12 týdnů po infekci;
- cysticercosis;
- teniasis;
- fascioliasis - protilátky jsou stanovovány v akutním stadiu onemocnění;
- opisthorchiasis - provádět diferenciální diagnostiku mezi chronickou a akutní formou onemocnění;
- giardiáza;
- viscerální a kožní leishmanióza;
- amébiáza;
- toxoplazmóza.
Krevní test ELISA na parazity se používá k detekci antigenů (parazitů a jejich metabolických produktů) a protilátek (imunoglobulinů). Imunoglobuliny jsou v těle produkovány jako protilátky proti antigenům. Specifičnost této metody při stanovení parazitů je 90%. Pomocí této analýzy je možné určit typ parazitů, jejich počet a díky hladině protilátek sledovat dynamiku vývoje procesů.